本發(fā)明涉及新的N-苯甲酰脲化合物，以其為有效成份的抗腫瘤組合物，服用這些化合物來(lái)治療癌癥的方法以及制備這些化合物的方法。更具體地講，本發(fā)明涉及包括N-苯甲?；?N′-[4-2-嘧啶基氧代或吡啶基氧代）-苯基]脲，N-苯甲?；?N′-[3-2-嘧啶基氧代）-苯基]脲，和N-苯甲?；?N′-[3-2-噠嗪基氧代）-苯基脲類(lèi)化合物。
下述文獻(xiàn)披露了與本發(fā)明化合物相似的化合物。
日本未審查專(zhuān)利（早期公開(kāi)）No.10972V1982公開(kāi)了N-苯甲?；?N′-[4-2-嘧啶基氧代或吡啶基氧代）苯基]脲化合物。然而這些化合物在化學(xué)結(jié)構(gòu)，即直接與脲基相連的苯環(huán)上的取代基與本發(fā)明的化合物不同。此外，本發(fā)明的化合物在抗腫瘤效果方面比上述公開(kāi)的化合物強(qiáng)。申請(qǐng)人認(rèn)為沒(méi)有先有技術(shù)披露過(guò)相似于本發(fā)明的N-苯甲?；?N′-[3-2-嘧啶基氧代）苯基]脲化合物和N-苯甲酰基-N′-[3-噠嗪基氧代）苯基]脲化合物。最相關(guān)的先有技術(shù)文獻(xiàn)可能是日本未審查專(zhuān)利申請(qǐng)No35174/1983，No72566/1983，美國(guó)專(zhuān)利4418066和英國(guó)專(zhuān)利2062634。然而它們所公開(kāi)的是N-苯甲?；?N′-[3-（苯氧基）苯基]脲化合物和N-苯甲?；?N′-[3-（2-吡啶基氧代）-苯基]脲化合物，這些化合物與本發(fā)明的化合物在化學(xué)結(jié)構(gòu)上有實(shí)質(zhì)性的差別，并且只披露過(guò)基作為農(nóng)藥，主要是殺蟲(chóng)劑的應(yīng)用，而未披露或建議過(guò)其有抗腫瘤活性。
本發(fā)明的發(fā)明人對(duì)N-苯甲?；?N′-取代的苯基脲化合物進(jìn)行了大量的研究，特別是對(duì)取代基的變化進(jìn)行了大量的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)帶有一些特別取代基的新的N-苯甲酰脲化合物具有很高的抗腫瘤活性。
此外，這類(lèi)化合物一般幾乎不能溶在水和有機(jī)溶劑中，相應(yīng)地也不易被腸道所吸收。因此由于服藥方式，這些化合物有時(shí)顯示不出其抗腫瘤活性，使通過(guò)腹內(nèi)服用這些藥物來(lái)進(jìn)行治療受到了限制。然而，本發(fā)明通過(guò)一種簡(jiǎn)單的配方來(lái)服用本發(fā)明的化合物可治療腫瘤和癌癥并顯示出良好的抗腫瘤活性且無(wú)副作用。本發(fā)明包括上述內(nèi)容。
本發(fā)明提供通式（Ⅰ）的N-苯甲酰脲化合物：
其中X是氫，囟原子或硝基，n是1至3的整數(shù)，Q是
其中Y1是未取代或取代的烷基，或烷氧基或烷基部分是被取代或未被取代的烷氧羰基，Y2是氫，囟原子，硝基，取代或未取代的烷基，或烷氧基或烷基部分是被取代或未被取代的烷氧羰基，Z是氫，囟原子，三氟甲基或硝基，每一個(gè)A和B是＝CH-或氮原子，A和B中的一個(gè)是＝CH-另一個(gè)是氮原子，其條件是（1）當(dāng)Q是
其中A是＝CH-，
其中當(dāng)X是氫和Y1是烷基時(shí)Z不是氫，囟原子也不是三氟甲基，（2）當(dāng)Q是
其中A是氮原子，Y1是三氟甲基，Y2不是氫原子。
本發(fā)明還提供了以這些化合物作為活性成份的抗腫瘤組合物，使用這些化合物治療癌癥的方法以及制備這些化合物的過(guò)程。
參照優(yōu)先選用的實(shí)施方案下面詳述本發(fā)明。
在上述通式（Ⅰ）中，當(dāng)Y1或Y2是取代的烷基，或烷氧基或烷基部分被取代了的烷氧羰基時(shí)，烷基或烷基部分可被一個(gè)或更多的下列的基團(tuán)所取代;囟素、烷氧基、烷硫基、氰基和硫氰酯基。烷基和烷基部分可有1至6個(gè)碳原子，具體地說(shuō)，它們可以是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基。
通式（Ⅰ）中的囟原子包括氟、氯、溴、碘。通式（Ⅰ）所代表的優(yōu)先選用的化合物如下。
（1）（X）n是1或2個(gè)囟原子或硝基。
（2）Y1是可被囟素、烷氧基、烷硫基、氰基或硫氰酸酯基取代的烷基或烷氧基，最好選用可被囟素、烷氧基或烷硫基取代的烷基，特別是可被囟素取代的烷基。
（3）Y2是氫原子或可被囟素、烷氧基、烷硫基、氰基或硫氰酸酯基取代的烷基或烷氧基，最好是氫原子或烷基。
（4）Q是
最好是
其中Z最好是囟原子。
通式（Ⅰ）的N-苯甲酰脲化合物，可通過(guò)上述方法制備，例如，通過(guò)一種方法，該方法包括通式Ⅱ的化合物：
其中R1是異氰酸酯基，氨基，
其中X，Y1，Y2和n定義同上，與具有下述通式的化合物反應(yīng)
其中R2是
（其中Y1和Y2如上所定義，R3是氨基或是不同于R1的異腈酸酯基）或囟原子反應(yīng)，當(dāng)R1是
時(shí)，R2是囟原子，當(dāng)R1的異氰酸酯基或氨基時(shí)，R2是
A，B和Z如上所定義。
現(xiàn)在詳述上述方法。
A-1
在溶劑存在下
-→Ⅰ
0-120℃，0.1-24小時(shí)
在上述反應(yīng)中可使用的溶劑是辛烷苯、甲苯、二甲苯、一氯甲苯、吡啶、二烷、四氫呋喃、二甲基亞砜、二甲基乙酰胺，乙酸乙酯，丙酮或甲基乙基酮。
[A-2]
在溶劑存在下
-→Ⅰ
50℃-回流溫度0.1-24小時(shí)
反應(yīng)中所用溶劑可與反應(yīng)[1]相同。
[A-3]
在堿性物質(zhì)和溶劑存在下
-→Ⅰ
0℃-回流溫度
0.1-24小時(shí)
其中Hal是囟原子。
可使用的堿性物質(zhì)是NaOH，KOH，Na2CO3，K2CO3，AgCO3，氫化鈉，正-丁基鋰等。
所用溶劑可以是惰性極性溶劑，如二甲基亞砜，二甲基甲酰胺，六甲基磷酰胺或Sulforane，酮，如丙酮，甲、乙酮或甲基異丁基酮，或囟代烴如二氯甲烷，氯仿等。
[A-4]
在堿性物質(zhì)和溶劑存在下
-→Ⅰ
0-150℃，0.1-24小時(shí)
其中Hal是囟原子。
所用堿性物質(zhì)和溶劑同反應(yīng)[A-3]。可以制備用在上述[A-1]反應(yīng)中的式Ⅲ-1的苯胺化合物，例如，可以通過(guò)下述方法來(lái)制備。
[B-1]
在堿性物質(zhì)和溶劑存在下
-→[Ⅲ-1]
0-200℃，0.1-10小時(shí)
其中Hal是囟原子，M是氫原子，鉀或鈉。
在上述反應(yīng)中，當(dāng)M是氫原子時(shí)則需要堿性物質(zhì)存在。用在上述反應(yīng)中的堿性物質(zhì)和溶劑可與反應(yīng)[A-3]中所用的相同。優(yōu)先選用在氮?dú)夥障逻M(jìn)行縮合反應(yīng)。
[B-2]
在堿性物質(zhì)和溶劑存在下進(jìn)行反應(yīng)
-→
室溫-250℃;1小時(shí)-1星期
還原鐵，冰乙酸
-→[Ⅲ-1]
80℃-回流溫度
0.1-1小時(shí)
其中Hal是囟原子。
用在上述反應(yīng)中的堿性物質(zhì)和溶劑可與反應(yīng)[A-3]相同。
[B-3]
與步驟[B-1]相同
-→
濃硫酸和硝酸
-→
-50℃-100℃，0.1-1小時(shí)
相同于[B-2]的步驟2
-→[Ⅲ-1]
[B-4]
與步驟[B-1]相同→
N-氯琥珀酸亞胺
BPO，CCl4
-→
60℃-回流溫度
2-12小時(shí)
M′Y1，乙醇
-→
20℃-回流溫度
1-12小時(shí)
與[B-3]步驟2相同
-→
與[B-2]步驟2相同
-→
其中M′是鈉或鉀，Y′是囟原子，烷氧基，烷硫基，氰或硫氰酸酯基。
[B-5]
與步驟[B-1]相同
-→
HgCl2，乙腈
-→
80℃-回流溫度
3-10小時(shí)
（C2H5）2NSF3
CH2Cl2
-→
0℃-回流溫度
1-6小時(shí)
與[B-3]步驟2相同
-→
與[B-2]步驟2相同
-→
用于上述[A-2]反應(yīng)中的式Ⅲ-2的異氰酸酯化合物，例如，可用下述方法制備：
[B-6]在溶劑存在下
（Ⅲ-1）+Cocl2-→[Ⅲ-2]
50℃-150℃0.1-24小時(shí)
所用溶劑對(duì)碳酰氯必須是惰性的，可與上述反應(yīng)[A-1]所用的相同，其條件是不包括二甲基亞砜。
用在上述反應(yīng)[A-3]中的式Ⅱ-3的N-苯甲?；?N′-苯基脲化合物，例如，可用下述方法制備：
[B-7]
與步驟[A-1]相同[Ⅲ-3]
（Ⅱ-1）+-→
用于上述反應(yīng)[A-1]的式[Ⅳ-1]的苯胺化合物可使用相應(yīng)的原料以同上反應(yīng)[B-1]-[B-5]的方式制備。式[Ⅳ-2]的異氰酸酯化合物和式Ⅱ-4的脲類(lèi)化合物（用于反應(yīng)[A-2]和[A-4]）可分別以相似于上述反應(yīng)[B-6]和[B-7]的方式來(lái)制備。用于制備式Ⅰ的N-苯甲酰脲化合物的中間體，如上所述，大多數(shù)被下式Ⅵ和Ⅶ所代表，并且是新的。
其中R3，Y1，Y2和Z如上所定義。
表1列出了式Ⅵ有代表性的化合物。
表1
續(xù)
其中R-3，Y2，A，B和Z如上所定義。
表2.給出了式Ⅶ有代表性的化合物。
表2
續(xù)
注：中間體32-34的物理性質(zhì)是折光指數(shù)。相似于表2中的下述化合物可能被涉及。
中間體48：2-甲基-3-（5-氯-2-嘧啶基氧代）苯胺。
中間體49：2-甲基-3-（5-溴-2-嘧啶基氧代）苯胺。
下述實(shí)施例將進(jìn)一步介紹本發(fā)明，但這些實(shí)施例并不限定本發(fā)明。
合成實(shí)施例1
1號(hào)化合物的合成
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[3-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-4-甲基苯基]脲
（1）在氮?dú)夥障?，?00℃將19.8克的5-氨基-2-甲基苯酚，37克的碳酸鉀，20克的2，5-二氯嘧啶和200毫升的二甲基亞砜的混合物反應(yīng)1.5小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入水中，用乙酸乙酯提取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥，用硅膠柱色譜提純，得到30克的3-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-4-甲基苯胺，其熔點(diǎn)為86-91℃。
（2）將20克從步驟（1）得到的3-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-4-甲基苯胺溶于100毫升二噁烷中，將其溶液加入到19.6克的2硝基苯甲?；惽杷狨ブ校谑覝胤磻?yīng)18小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入水中，在50℃用熱水洗滌，然后用甲醇洗滌，得到33.6克所需產(chǎn)物，熔點(diǎn)214-219℃。
合成實(shí)施例2
合成8號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[3-（6-氯-3-噠嗪基氧代）-4-甲基苯基]脲
（1）在氮?dú)夥障?，?20℃將4.0克的3，6-二氯噠嗪，3.3克的5-氨基-2-甲基苯酚，3.73克的碳酸鉀和40毫升的二甲基亞砜的混合物反應(yīng)1小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入水中，用乙酸乙酯提取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑后用硅膠柱色譜提純，得到3.4克的3-（6-氯-3-噠嗪基氧代）-4-甲基苯胺，熔點(diǎn)116-118℃。
（2）將2.0克上述步驟1得到的產(chǎn)物溶于20毫升二噁烷中，所得溶液加入到1.95克的2-硝基苯甲?；惽杷狨ブ?，在室溫反應(yīng)該混合物17小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入水中，用乙酸乙酯提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥反應(yīng)產(chǎn)物，蒸去溶劑。用硅膠柱色譜提純剩余物，得到3.4克所需產(chǎn)物，熔點(diǎn)231-236℃。
合成9號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[4-（氟-3-（5-碘代-2-嘧啶基氧代）苯基]脲
（1）在100℃將2.0克的2-氯-5-碘代嘧啶，1.03克的2-氟苯酚，2.30克的碳酸鉀和20毫升的二甲基亞砜的混合物反應(yīng)1小時(shí)。
反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物傾入水中，用乙酸乙酯提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑得到2.56克的2-（2-氟苯氧基）-5-碘代嘧啶。
（2）將2.56克上述步驟（1）的產(chǎn)物溶于10毫升濃硫酸中，將由0.68毫升硝酸與2毫升濃硫酸組成的混合物緩慢地滴加到上述溶液中于室溫進(jìn)行反應(yīng)。
完成反應(yīng)后，將反應(yīng)產(chǎn)物傾入到冰水中，用乙酸乙酯提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑。用硅膠柱色譜提純剩余物，得到1.77克的2-（2-氟代-5-硝基苯氧基）-5-碘代嘧啶。
（3）將從步驟（2）得到1.6克2-（2-氟-5-硝基苯氧基）-5-碘代嘧啶加入到10毫升冰乙酸中，加熱至90℃，然后逐漸地加入1.24克還原鐵?；亓骰旌衔?分鐘，將溫度降至室溫。加入丙酮和水的混合物，過(guò)濾混合物。蒸發(fā)掉濾物中的溶劑，將剩余物傾入水中，用乙酸乙酯提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥提取物，蒸去溶劑。用硅膠柱色譜提純剩余物，得到1.31克3-（5-碘代-2-嘧啶基氧代）-4-氟苯胺。
（4）將1.31克從上述步驟（3）中得到的產(chǎn)物溶于20毫升二噁烷中，加入1.15克2-硝基-苯甲?；惽杷狨ィ谑覝胤磻?yīng)混合物15小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入到50℃的溫水中，過(guò)濾，用50℃水洗滌，然后懸浮于乙酸乙酯中，加入正己烷，過(guò)濾，得到1.80克所需產(chǎn)物，熔點(diǎn)220-221℃。
合成實(shí)施例4
合成23號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲酰基）-N′-[4-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-3-甲基苯基]脲
（1）在氮?dú)夥障掠?00℃將20克的4-氨基-2-甲基苯酚，3.7克的碳酸鉀，2.0克的2，5-二氯嘧啶和20毫升的二甲基亞砜的混合物反應(yīng)2小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入水中用乙酸乙酯提取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥，用硅膠柱色譜提純，得到2.0克的4-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-3-甲基苯胺，其折光指數(shù)（nD22.4）＝1.6105。
將從以上步驟（1）中得到的2.00克4-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-3-甲基苯胺溶于30毫升二噁烷中，然后將其加入到裝有2.12克的2-硝基苯甲?；惽杷狨サ臒?jī)?nèi)。在室溫將該混合物反應(yīng)14小時(shí)。
完成反應(yīng)后將產(chǎn)物傾入50℃溫水內(nèi)，過(guò)濾。用50℃溫水洗滌所得結(jié)晶，然后懸浮于乙酸乙酯中，加入正己烷后過(guò)濾，得到2.82克的所需產(chǎn)物，熔點(diǎn)204-206℃。
合成實(shí)施例5
合成30號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[4-（5-溴-2-嘧啶基氧代）-3-甲氧基甲基苯基]脲
（1）在4個(gè)大氣壓的氫氣壓力及振蕩條件下將2.2克的2-氯-6-甲氧基甲基-4-硝基苯酚，0.30克的10%鈀碳，11.50克的氧化鎂，20毫升的乙醇和30毫升水的混合物反應(yīng)10小時(shí)。
反應(yīng)完成后，向產(chǎn)物內(nèi)加入丙酮，過(guò)濾混合物，減壓蒸餾過(guò)濾物得到剩余物。再加入丙酮，重復(fù)上述過(guò)程。用硅膠柱色譜提純，得到1.27克的4-氨基-2-甲氧基甲基苯酚，熔點(diǎn)121-126℃。
（2）在氮?dú)夥障掠?00℃將1.60克5-溴-2-氯嘧啶，1.27克的4-氨基-2-甲氧基甲基苯酚，2.30克的碳酸鉀和30毫升的二甲基亞砜的混合物反應(yīng)1小時(shí)。
完成反應(yīng)后將產(chǎn)物傾入水中，用乙酸乙酯提取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥，用硅膠柱色譜提純，得到1.38克的4（5-溴-2-嘧啶基氧代）-3-甲氧基甲基苯胺，熔點(diǎn)89-95℃。
（3）將1.38克從上述步驟（2）中所得到的產(chǎn)物溶于10毫升二噁烷中，然后將其滴加到1.04克的2-硝基苯甲酰基-異氰酸酯在10毫升二噁烷的溶液中，在室溫將混合物反應(yīng)17小時(shí)。
完成反應(yīng)后，將產(chǎn)物傾入水中，用丙酮提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥提取物，蒸去乙酸乙酯。用硅膠柱色譜提純剩余物，用甲醇洗滌所得結(jié)晶，用二甲基亞砜溶解并傾入水中，過(guò)濾后得到1.66克所需產(chǎn)物，其熔點(diǎn)為187-189℃。
合成實(shí)施例6
合成34號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲酰基）-N-[4-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-3-二氟-甲基苯基]脲
（1）將15克的水楊醛和13.9克的乙二硫醇溶于100毫升乙酸中，在冰冷卻下逐漸加入12毫升三氟化硼（乙醚復(fù)合物）。
滴加完后，混合物在室溫下攪拌反應(yīng)1小時(shí)。
反應(yīng)完成后減壓蒸去乙酸，向剩余物內(nèi)加入乙酸乙酯和水進(jìn)行提取。用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉的水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸去溶劑，得到22.8克的2-（2-羥苯基）-1，3-二硫戊環(huán)（dithiolan）。
（2）將8.5克-二氯嘧啶，12.4克從前述步驟（1）得到的產(chǎn)物和10克的碳酸鉀溶于50毫升二甲基甲酰胺中，在100℃，攪拌反應(yīng)。
反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物浸入冰水中，用乙酸乙酯提取。用水和飽和氯化鈉水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到14.6克的2-[2-（5-氯-2-嘧啶基氧代）苯基]-1，3-二硫戊環(huán)。
（3）28.7克的氯化汞溶于由300毫升乙腈和60毫升水所組成的溶劑混合物中，然后在攪拌下逐漸向其內(nèi)滴入160毫升乙腈和12毫升水內(nèi)溶有14.9克二硫戊環(huán)（上述步驟（2）中得到）的溶液。
滴加完成后，在室溫?cái)嚢杌旌衔镏敝猎先芙?。然后升溫至回流溫度，反?yīng)4小時(shí)。
反應(yīng)完成后，從反應(yīng)產(chǎn)物中過(guò)濾出不溶物，減壓蒸去溶劑。向剩余物內(nèi)加入二氯甲烷和水進(jìn)行提取。用飽和和氯化鈉水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥。減壓蒸去溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到5.5克的2-（5-氯-2-嘧啶基氧基）苯甲醛。
（4）在室溫下將2.5克的苯甲醛二氯甲烷（5毫升）溶液（上述步驟3得到）逐滴地加入到溶于1.9克二乙氨基硫三氟化物的二氯甲烷溶液中。滴加完成后，在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1小時(shí)。
反應(yīng)完成后，將反應(yīng)產(chǎn)物傾入到冰水中，用飽和氯化鈉水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸去溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到1.1克的2-（5-氯-2-嘧啶基氧基）-苯并二氟化物。
（5）在冰冷卻條件下將0.85毫升濃硝酸和0.85毫升濃硫酸的混合物滴加到溶有2.2克苯并二氟化物的濃硫酸（15毫升）溶液中，溫度保持在0～5℃。
反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物傾入冰水中，用二氯甲烷提取。用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉的水溶液洗滌提取物，用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸去溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到1.7克的2-（5-氯-2-嘧啶基氧基）-5-硝基苯并二氟化物。
（6）將1.7克從上述步驟（5）得到的產(chǎn)物溶于50毫升乙酸中，然后將該溶液加熱至90℃。在攪拌下加入2.3克還原鐵進(jìn)行反應(yīng)。
反應(yīng)完成后，從反應(yīng)產(chǎn)物中濾出不溶物，加入二氯甲烷和水提取過(guò)濾物。用飽和碳酸氫鈉和氯化鈉水溶液洗滌提取物，然后用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸去溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到0.56克的5-氨基-2-（5-氯-2-嘧啶基氧基）-苯并二氟化物。
（7）0.96克的氨基苯并二氟化物（步驟（6）得到）的二噁烷溶液（10毫升）在室溫被逐漸地滴加到由二硝基苯胺制得的0.74克2-硝基苯甲酰異氰酸酯的二烷（5毫升）溶液內(nèi)。滴加完后，在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物1小時(shí)。
反應(yīng)完成后，減壓蒸去二噁烷，用二氯甲烷重結(jié)晶剩余物，得到0.9克的N-（2-硝基苯甲?；?N′-[4-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-3-二氟甲基苯基]脲，熔點(diǎn)185-186℃。
合成實(shí)施例7
合成24號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲酰基）-N′-[4-（5-溴-2-嘧啶基氧代）-3-甲基苯基]脲
（1）除了1.27克的4-氨基-2-甲氧基甲基苯酚被1.02克的4-氨基-2-甲基苯酚代替外其它過(guò)程均同于合成實(shí)施例5（2）的過(guò)程，制得4-（5-溴-2-嘧啶基氧代）-3-甲基苯胺。
（2）將1.7克的苯胺（步驟1得到）溶于5毫升乙酸乙酯中，在室溫將其加入到在15毫升乙酸中含有0.01摩爾的碳酸氯的溶液內(nèi)，在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物3小時(shí)，然后在回流條件下，再反應(yīng)1小時(shí)。
反應(yīng)完成后減壓蒸除乙酸乙酯，真空干燥剩余物，得到1.8克的4-（5-溴-嘧啶基氧代）-3-甲基苯基異氰酸酯。
（3）將1.8克的從上述步驟（2）得到的異氰酸酯溶于20毫升的甲苯中，在攪拌下加入0.98克的2-硝基苯胺，在回流下反應(yīng)混合物4小時(shí)。
反應(yīng)完成后，向產(chǎn)物內(nèi)加入10毫升甲醇，冷卻混合物。過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶物，得到1.2克所需產(chǎn)物。
合成實(shí)施例8
合成37號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[4-（5-氯-2-嘧啶基氧代）-3-乙基苯基]脲
（1）將5.78克的2-硝基苯甲?；惽杷狨ト苡?0毫升二噁烷中，然后在室溫將其滴加加入溶有4.12克4-氨基-2-乙基苯酚的二噁烷（100毫升）中，在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物12小時(shí)。
反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物傾入水中，過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶，用甲醇洗滌得到N-（3-乙基-4-羥苯基）N′-（2-硝基苯甲?；?脲。
（2）將上述步驟（1）所得到的脲溶于100毫升二甲基亞砜中，加入1.4克的氫氧化鉀，然后再加入4.9克的2.5-二氯嘧啶。在50℃反應(yīng)混合物5小時(shí)。
反應(yīng)完成后，向反應(yīng)產(chǎn)物內(nèi)加入200毫升的甲醇，過(guò)濾收集沉淀的結(jié)晶，用水和甲醇洗滌結(jié)晶得到所需的產(chǎn)物。
合成實(shí)施例9
合成51號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲酰基）-N′-[4-（5-氯-2-吡啶基氧代）-3-三氟甲基苯基]脲
（1）將10克的5-氯-2-吡啶酮，14.3克的2-氯-5-硝基苯并三氟化物，26.6克的碳酸鉀和60毫升的二甲基亞砜的混合物在100℃反應(yīng)2小時(shí)。
反應(yīng)完成后，產(chǎn)物被傾入70毫升乙醚中，連續(xù)地用水，10%氫氧化鈉水溶液，和飽和氯化鈉水溶液各洗滌二次，然后用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸發(fā)掉溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到6.4克的2-（5-氯-2-吡啶基氧代）-5-硝基苯并三氟化合物。
（2）將6克從步驟（1）得到的產(chǎn)物溶于40毫升冰乙酸中，在強(qiáng)烈攪拌下加入6.3克還原鐵，反應(yīng)混合物30分鐘。
反應(yīng)完成后，從反應(yīng)產(chǎn)物中濾出不溶物，蒸去溶劑。用80毫升二氯甲烷溶解不溶物，用飽和碳酸氫鈉水溶液，洗滌二次，用無(wú)水硫酸鉀干燥。蒸去溶劑，得到4.2克的4-（5-氯-2-吡啶基氧代）-3-三氟甲基苯胺。
（3）將在5毫升二噁烷中溶有1.6克2-硝基苯甲?；惽杷狨サ娜芤旱渭拥?毫升溶有2.0克上述步驟（2）產(chǎn)物的二烷溶液內(nèi)，在室溫將混合物反應(yīng)過(guò)夜。反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物傾入水中過(guò)濾，用甲醇洗滌。用乙酸乙酯溶解所得結(jié)晶，濾出不溶物。加入正己烷進(jìn)行結(jié)晶，得到3.1克所需產(chǎn)物，熔點(diǎn)196-198℃。
合成實(shí)施例10
合成55號(hào)化合物
N-（2，4-二硝基苯甲?；?N′-[3-三氟甲基-4-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）苯基]脲
（1）將6克的2-三氟甲基苯酚，5.9克2-氯-5-三氟甲基吡啶，9.6克碳酸鉀和40毫升二甲基亞砜的混合物在100℃反應(yīng)4小時(shí)。
反應(yīng)完成后，將產(chǎn)物傾入到70毫升乙醚中，分別用水，10%氫氧化鈉水溶液，和飽和氯化鈉水溶液連續(xù)地洗滌2次，然后用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，得到8.2克的2-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）苯并三氟化物。
（2）將8克2-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）-苯并三氟化物（步驟1得到）溶于45毫升濃硫酸中，將其冷卻至0℃后，在0-5℃滴加入3.3克的60%硝酸。滴加完后在0-5℃將混合物攪拌反應(yīng)1小時(shí)。
反應(yīng)完成后，將反應(yīng)產(chǎn)物傾入水中，用二氯甲烷提取二次。用飽和氯化鈉水溶液洗滌2次，用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，得到7.2克的2-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）-5-硝基苯并三氟化物。
（3）將7克2-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）-5-硝基苯并三氟化物（步驟（2）得到）溶于50毫升冰乙酸中，在強(qiáng)烈攪拌下加入6.7克還原鐵?；旌衔锓磻?yīng)30分鐘。
反應(yīng)完成后，從反應(yīng)產(chǎn)物中過(guò)濾出不溶物，蒸發(fā)掉溶劑。所得剩余物溶于二氯甲烷中，用碳酸氫鈉水溶液洗滌2次，用無(wú)水硫酸鈉干燥。蒸去溶劑，用硅膠柱色譜提純，得到2.7克的4-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）-3-三氟甲基苯胺。
（4）將通過(guò)溶解1.4克的2，4-二硝基苯并異氰酸酯溶于5毫升二噁烷得到的溶液滴加到溶有1.5克上述步驟（3）產(chǎn)物的8毫升二噁烷溶液內(nèi)，在室溫將混合物反應(yīng)過(guò)夜。
反應(yīng)完成后將反應(yīng)產(chǎn)物傾入水中，過(guò)濾。用乙酸乙酯溶解所得結(jié)晶，濾出不溶物。加入正己烷進(jìn)行結(jié)晶，得到1.8克的所需產(chǎn)物，熔點(diǎn)235-238℃。
下面的表3和表4給出了本發(fā)明有代表性的化合物。
表3
表3（續(xù)）
表4
表4（續(xù)）
作為相似于表3的化合物，可能涉及到下述化合物。
58號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[2-甲基-3-（5-氯-2-嘧啶基氧代）苯基]脲，熔點(diǎn)214-216℃。
59號(hào)化合物
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[2-甲基-3-（5-溴-2-嘧啶基氧代）苯基]脲，熔點(diǎn)206-208℃。
本發(fā)明的這些化合物對(duì)抗腫瘤病是有效的，P-388血友病，L-1210血友病，B-16黑素瘤，M-5076肉瘤，克隆38，克隆26，路易斯肺癌等的動(dòng)物試驗(yàn)，如小鼠試驗(yàn)已證明了這一點(diǎn)。
另一方面，國(guó)家癌癥研究所對(duì)一些試驗(yàn)化合物進(jìn)行了體內(nèi)試驗(yàn)以測(cè)定其作為為抗腫瘤藥的適應(yīng)性，并發(fā)表了試驗(yàn)報(bào)告。詳見(jiàn)“癌癥化學(xué)療法報(bào)告”第三部，卷3，2號(hào)（1972年），作者：Dera，Gveenberg，Maedonald，Sehumaeher和Abbott。試驗(yàn)報(bào)告中介紹了標(biāo)準(zhǔn)的抗腫瘤試劑篩選試驗(yàn)，其中兩組試驗(yàn)系統(tǒng)對(duì)本發(fā)明來(lái)講十分重要。它們是淋巴血友病P388和黑素病的黑素瘤B-16。在小鼠中發(fā)現(xiàn)這些瘤。一般來(lái)講，好的抗腫瘤活性在試驗(yàn)報(bào)告中是以治療過(guò)的動(dòng)物（T）高于對(duì)照組動(dòng)物（C）的平均幸存時(shí)間增加的百分比來(lái)表示的，在人類(lèi)血友病的治療過(guò)程中其治療作用是相似的。
通過(guò)試驗(yàn)來(lái)證明抗腫瘤活性時(shí)，平均幸存時(shí)間比T/C×100≥125%被認(rèn)為是必要的。
下面介紹本發(fā)明的N-苯甲酰脲化合物的抗腫瘤活性，急性毒理試驗(yàn)，使用劑量和服用方式。
（1）抗腫瘤活性
試驗(yàn)實(shí)施例1（腹內(nèi)-腹內(nèi)）
使用BDF1小鼠，腹內(nèi)注射P-388血友病細(xì)胞，注射量為1×106細(xì)胞/小鼠。服用試驗(yàn)化合物2次，即注射后1天和4天各一次。觀察小鼠30天內(nèi)的生死情況。對(duì)照組小鼠服用生理鹽水其ILS（%）定為0，以此來(lái)確定每一治療組所增加的生存時(shí)間ILS（%）。
下表5給出了結(jié)果。試驗(yàn)化合物內(nèi)加入少量的表面活性劑（吐溫-80）配成試驗(yàn)用藥。
表5
表5續(xù)
注：
ILS（%）＊根據(jù)下式計(jì)算增加的生存時(shí)間：
ILS（%）＝MST-100，
其中MST是試驗(yàn)和對(duì)照動(dòng)物的平均生存時(shí)間之比。
試驗(yàn)實(shí)施例2（腹內(nèi)-口服）
使用BDF小鼠，注射P-388血友病細(xì)胞，注射量為1×106細(xì)胞/小鼠。服用2次試驗(yàn)藥物，即注射后1天和4天服用。觀察小鼠30天內(nèi)的生死情況。對(duì)照組服用生理鹽水，ILS%定為0，以此來(lái)確定每一治療組所增加的生存時(shí)間ILS（%）。
下表6-1，6-2和6-3給出了試驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)下述的配方實(shí)施例4配制試驗(yàn)和比較藥物。
表6-1
表6-2（續(xù)）
注：ILS%定義同上。
比較化合物1：
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[3-氯-4-（5-碘代-2-嘧啶基氧代）苯基]脲;公開(kāi)于日本未審查專(zhuān)利109721/1982。
比較化合物2
N-（2-氯苯甲?；?N′-[3-氯-4-（5-氯代-2-嘧啶基氧代）苯基]脲;公開(kāi)于日本未審查專(zhuān)利109721/1982。
比較化合物3
N-（2-硝基苯甲?；?N′-[3-氯-4-（5-三氟甲基-2-吡啶基氧代）苯基]脲，公開(kāi)于日本未審查專(zhuān)利31664/1982和109721/1982。
試驗(yàn)實(shí)施例3（腹內(nèi)-口服）
使用BDF1小鼠，腹內(nèi)注射L-1210血友病細(xì)胞，注射量為1×105細(xì)胞/小鼠?？诜囼?yàn)藥物2次，即注射后1天和8天。觀察小鼠30天內(nèi)的生死情況，對(duì)照組小鼠服用生理鹽水其ILS%定為0，以此來(lái)確定每一治療組的ILS（%）。表7給出了實(shí)驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)下述配方4實(shí)例來(lái)配制試驗(yàn)和比較藥物。
表7
注：
ILS（%）與上述定義相同，比較化合物1與表6-2所述相同。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例4（腹內(nèi)-口服）
使用BDF1小鼠，腹內(nèi)注射B-16黑素瘤細(xì)胞的懸浮液，注射量0.5毫升/小鼠?？诜囼?yàn)藥物3次，即注射后1天，8天和15天。觀察小鼠60天內(nèi)的生死情況，對(duì)照組小鼠服用生理鹽水，其ILS%定為0，以此來(lái)確定每一治療組的ILS（%）。下表8給出了試驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)下述配方實(shí)施例4配制試驗(yàn)藥物。通過(guò)下述過(guò)程制備B-16黑素瘤細(xì)胞的懸浮液：在無(wú)菌條件下通過(guò)皮下移植從57BL小鼠體內(nèi)取出腫瘤細(xì)胞，用不銹鋼篩過(guò)濾，將1克腫瘤細(xì)胞懸浮于9毫升等滲溶液中，如培養(yǎng)基或生理鹽水中。
表8
注：
ILS（%）定義同表5，
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例5（腹內(nèi)-口服）
使用BDF1小鼠，腹內(nèi)注射M5076肉瘤細(xì)胞，注射量為1×106細(xì)胞/小鼠。每日口服試驗(yàn)藥物3次，即注射后1天，8天和15天后服用。觀察小鼠60天內(nèi)的生死情況，給對(duì)照組小鼠服用生理鹽水，其ILS%定為0，以此來(lái)確定每一治療組的ILS（%）。表9給出了試驗(yàn)結(jié)果。根據(jù)下述的配方實(shí)施例4配制試驗(yàn)化合物和比較化合物。
表9
注：
ILS（%）定義同表5。
不管動(dòng)物害的病和服藥部位相同或不同，本發(fā)明的化合物都顯示出了很高的抗腫瘤病活性。對(duì)此原因不十分清楚，但可將本發(fā)明化合物良好的抗腫瘤病活性歸于藥物在腸道吸收，在血中的藥物濃度和藥物選擇治療部位方面都具有明顯優(yōu)勢(shì)所致。
（2）急性毒理試驗(yàn)
根據(jù)配方實(shí)施例4配制含有本發(fā)明1，5，20，23，26-29號(hào)化合物之一的藥物，將其以腹內(nèi)服用方式給藥于ddy小鼠。經(jīng)測(cè)定發(fā)現(xiàn)，每只小鼠每公斤至少25毫克藥物。本發(fā)明51號(hào)化合物的LD50值至少為50毫克/公斤，3，8，30，31，33，52，53和54號(hào)化合物中的每一化合物至少是100毫克/公斤，2，9，25，32，33，35，45和55號(hào)化合物中的每一化合物至少是400毫克/公斤。
（3）劑量和服用方式
對(duì)動(dòng)物來(lái)講服用本發(fā)明化合物的方式可以是注射，如腹內(nèi)注射，肌肉注射，局部注射等，或口服。
對(duì)人類(lèi)對(duì)講，服用本發(fā)明的化合物也可以注射的方式，如靜脈或動(dòng)脈注射，局部注射等，或口服，栓劑等方式。
考慮到動(dòng)物試驗(yàn)和各種條件，本發(fā)明化合物的服用劑量，不論是連續(xù)或間歇服用其總量應(yīng)不超出一定的水平。當(dāng)然所用劑量可適當(dāng)?shù)淖兓?，這根據(jù)服藥方式，被治療的動(dòng)物和人的情況（如年齡、體重、性別、敏感程度、食物等）服藥間隔，藥中的化合物成份，病的程度等來(lái)定。在一定條件下的最適劑量和服藥次數(shù)應(yīng)由藥學(xué)專(zhuān)家來(lái)決定。
以一般的方式制備本發(fā)明的抗腫瘤組合物。例如，可用活性成份和各種藥理上可接受的輔劑如無(wú)活性的稀釋劑等來(lái)制備。最適宜的服用方式是口服和靜脈注射。本發(fā)明抗腫瘤組合物中活性成份的量是可變的，其根據(jù)不同的情況而定，不能一概而論?；钚猿煞莸牧颗c一般抗腫瘤組合物中的量相似。例如組合物可含有至少0.001%（重量）的活性成份。
本發(fā)明的化合物幾乎不溶于水和有機(jī)溶劑。因此最好是將其配成含有磷脂的水懸浮液。作為制備不含磷酯的水懸浮液的方法，一種在本發(fā)明中所涉及的方法，如果需要的話(huà)，則將活性化合物噴霧成細(xì)粉，然后將該細(xì)粉加到含有表面活性劑的水溶液中，如果需要，可加入脫泡劑，將該混合物在一濕體系內(nèi)噴霧為粒度不大于5μm的顆粒，最好是不大于2μm（80%的顆粒），并加入增稠劑。表面活性劑的具體實(shí)例有：氧化乙烯聚芳基苯酚磷酸酯，聚氧化乙烯硬化蓖麻由油，氧化乙烯基脫水山梨醇脂肪酸酯、糖酯、聚氧化乙烯聚氧化丙烯嵌段聚合物等等。胞泡劑的具體實(shí)例有：二甲基聚硅氧烷，甲基苯基聚硅氧烷，脫水山梨醇脂肪酸酯，聚氧化乙烯-聚氧化丙烯十六烷醚，硅酮等等。增稠劑的具體實(shí)例有：瓜爾膠、藻酸、阿拉伯膠、果膠、淀粉、黃原酸（xanthabe）膠、明膠等等。另一方面，作為含有磷酯的水懸浮液的制劑，可用大豆磷脂或蛋黃磷酯代替表面活性劑，可用抗氧化劑如：α-生育酚，代替增稠劑。
此外，這些化合物可用一般方法配制成片劑，膠囊口服劑、粒劑、粉劑、注射液或栓劑。
下面介紹本發(fā)明的抗腫瘤藥物的配制實(shí)施例。
配方實(shí)施例1
將70毫克上述9號(hào)或23號(hào)化合物的非結(jié)晶粉末與30毫克的乳糖充分混合，將該100毫克混合物裝入膠囊制成口服膠囊藥。
配方實(shí)施例2
85份（重量）上述的3號(hào)或24號(hào)化合物的非結(jié)晶粉末與1份（重量）的葡萄糖，10份（重量）的玉米淀粉，1.5份重量的5%淀粉糊混合。用濕法將其造粒，然后加入1份（重量）的硬脂酸鎂。將混合物的制成口服藥片。
配方實(shí)施例3
將5克的上述2號(hào)或29號(hào)化合物溶于5毫升二甲基乙酸胺中，加入25毫升椰子油，7克的Pegkol（TohoRagakaK.K制造）和6克的HO-10M（TohoKagkuK.K制造）得到乳化液。加入相同量的消毒蒸餾水，將該混合物超聲振蕩20-30秒，得到油狀懸浮液。
配方實(shí)施例4
用離心噴霧機(jī)將本發(fā)明的1號(hào)或23號(hào)化合物基本上噴霧。另外，將5份（重量）的聚氧乙烯（60）硬化蓖麻油，0.2份（重量）的硅酮和0.3份（重量）的聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物加到79.5份（重量）的生理鹽水中制得水溶液，然后將10份（重量）的上述本發(fā)明1號(hào)或23號(hào)噴霧的化合物加入其中，通過(guò)使用玻璃珠的沙磨在一濕體系內(nèi)將上述混合物噴霧（80%的顆粒的粒度不大于5μm）。然后加入5份（重量）的黃原酸膠（2%溶液）得到水懸浮液。
配方實(shí)施例5
溶解1.5份（重量）的氧化乙烯聚芳基苯酚磷酸酯和0.2份（重量）的硅酮于53.3份（重量）的生理鹽水中，向其加入40份（重量）的5號(hào)或25號(hào)本發(fā)明的化合物，通過(guò)使用玻璃珠（90%）（顆粒的粒度不大于2μm）的沙磨濕體系噴霧混合物。然后加入5份（重量）的黃原酸膠（2%溶液），得到水懸浮液。
配方實(shí)施例6
用離心噴霧器將本發(fā)明1號(hào)化合物噴霧。將5份經(jīng)噴霧的1號(hào)化合物加入到由2份（重量）的蛋黃磷脂，0.001份（重量）的α-生育酚和92.999份（重量）的生理鹽水組成的溶液內(nèi)。然后在使用了玻璃珠（80%顆粒的粒度不大于2μm）的沙磨濕體系中噴霧所得混合物，以得到水溶液。
配方實(shí)施例7
用離心噴霧器處理本發(fā)明的37號(hào)化合物。將5份（重量）的聚氧乙烯（60）硬化麻油加入到60份生理鹽水中制得水溶液。將30份（重量）的上述噴霧化合物加到水溶液內(nèi)。在使用了玻璃珠的（80%顆粒的粒度不大于2μm）沙磨濕體系內(nèi)噴霧所得該水溶液。然后加入5份（重量）的黃原酸膠得到水懸浮液。
配方實(shí)施例8
溶解1.5份（重量）的氧化乙烯芳基苯酚磷酸酯，0.2份的硅酮和0.3份的聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物于81份（重量）的生理鹽水中，加入10份（重量）的本發(fā)明23號(hào)化合物，在一使用了玻璃珠（90%顆粒的粒度不大于2μm）的沙磨濕體系內(nèi)噴霧該混合物。然后加入7份（重量）（2%溶液）的黃原酸膠，得到懸浮水溶液。