本發(fā)明屬于真菌工業(yè)發(fā)酵技術(shù)。
冬蟲夏草系我國傳統(tǒng)名貴藥材，分布在青海、四川、甘肅、云南、西藏等省山區(qū)的雪線以上，生長期長，藥源稀少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足滋補(bǔ)、防病、治病的需要。
冬蟲夏草是蟲草真菌孢子，感染于蝙蝠蛾類幼蟲，于氣溫適宜時(shí)長出子座，稱之為草，即形成蟲菌復(fù)合體，采集來做為藥用，稱之為冬蟲夏草。
本發(fā)明所指的冬蟲夏草菌絲，系由新鮮天然冬蟲夏草標(biāo)本中分離純化得出的菌種，進(jìn)行人工發(fā)酵生產(chǎn)所得的冬蟲夏草菌絲體產(chǎn)品。
目前國內(nèi)研究已證實(shí)，人工培養(yǎng)的冬蟲夏草菌絲與天然冬蟲夏草在化學(xué)成份、藥理作用以及臨床療效等方面基本一致。此結(jié)果見（85）晉醫(yī)總科鑒定第1號(hào)文件（冬蟲夏草技術(shù)成果鑒定書、山西省醫(yī)藥總公司）。
本發(fā)明的目的系研究冬蟲夏草菌絲的工業(yè)生產(chǎn)方法，研究結(jié)果產(chǎn)率比目前國內(nèi)先進(jìn)水平有所提高。本發(fā)明冬蟲夏草菌絲收率達(dá)3～4%（發(fā)酵液體積對(duì)菌絲重量比），目前國內(nèi)先進(jìn)水平為1.5%。
本發(fā)明詳細(xì)說明如下
Ⅰ冬蟲夏草菌種的分離
將天然冬蟲夏草菌核洗凈、消毒，切成薄片，用每毫升含500～1000單位鏈霉素溶液浸泡2小時(shí)，然后取出薄片，放在平板培養(yǎng)基上（平板培養(yǎng)基同下述斜面培養(yǎng)基）靜止培養(yǎng)10天，即可見白色菌絲從薄片上長出，將白色菌絲進(jìn)一步分離純化，可得出冬蟲夏草菌種，此菌種經(jīng)中國科學(xué)院微生物研究所（陳慶濤教授）鑒定，為被孢霉屬（MortierellaSP）真菌菌絲。
Ⅱ菌種培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法
1.斜面培養(yǎng)基成份及制作
葡萄糖1%、蛋白腖1%、蠶蛹粉1%、磷酸二氫鉀0.15%、磷酸氫二鈉0.1%、瓊脂2%、PH7。
將上述成份混合后，定容至一定體積，壓力1公斤/平方厘米，滅菌30分鐘，分裝在試管中，每管5毫升，制成斜面。
2.斜面培養(yǎng)方法
在無菌條件下，將一環(huán)冬蟲夏草菌絲轉(zhuǎn)接在空白斜面上，在24℃～28℃恒溫箱中培養(yǎng)7天，即可為種菌使用。
3.搖瓶培養(yǎng)基成份及制作
葡萄糖6%、蛋白腖2%、蠶蛹粉2%、磷酸二氫鉀0.15%、磷酸氫二鈉0.1%、PH5。
將上述成份混合后，定容到一定體積，用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)PH到7.5。然后分裝到容積為500毫升的三角瓶中，每瓶100毫升培養(yǎng)液，壓力1公斤/平方厘米，滅菌30分鐘。
4.搖瓶培養(yǎng)條件
在無菌條件下，將1/4支斜面接入搖瓶中，在24℃～28℃恒溫室中靜止培養(yǎng)3天，然后在同樣溫度下，在往復(fù)式搖床上振蕩培養(yǎng)3天，往復(fù)式搖床振蕩頻率110次/分，振幅5厘米。
5.種子罐培養(yǎng)基及制作
培養(yǎng)基成份同搖瓶培養(yǎng)基，制作方法也相同。種子罐裝液量為總?cè)莘e的70%，壓力1公斤/平方厘米，滅菌30分鐘。
6.種子罐培養(yǎng)條件
在無菌條件下，將搖瓶種子液轉(zhuǎn)接入種子罐中，接種量1/10～1/20，培養(yǎng)溫度24℃～29℃，攪拌轉(zhuǎn)速250～350轉(zhuǎn)/分，風(fēng)量0.5～1∶1（V∶V），培養(yǎng)時(shí)間24～30小時(shí)。
Ⅲ發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法
1.發(fā)酵罐培養(yǎng)基成份及制作
葡萄糖6～9%、蛋白腖1～2%、蠶蛹粉1～2%、磷酸二氫鉀0.15%、磷酸氫二鈉0.1%、滅菌前PH7.5，消泡油適量。
發(fā)酵罐裝液量為總?cè)莘e的70%，滅菌壓力為0.8～1公斤/平方厘米，滅菌時(shí)間為30分鐘。
2.發(fā)酵罐培養(yǎng)條件
將種子罐培養(yǎng)好的種子液接入發(fā)酵罐中，接種量1/10～1/30，在24℃～29℃下培養(yǎng)，攪拌轉(zhuǎn)速200～250轉(zhuǎn)/分，風(fēng)量1-2∶1（V∶V），罐壓0.5公斤/平方厘米，培養(yǎng)時(shí)間為40～48小時(shí)。
Ⅳ后處理
1.分離菌絲
終止發(fā)酵后，用板框壓滬機(jī)或離心機(jī)收集菌絲，離心轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)/分，用水洗菌絲2～3次。
2.干燥菌絲
將濕菌絲放入烘房干燥箱中，氣流干燥，干燥溫度為60℃～100℃
Ⅴ工藝流程
斜面→500毫升搖瓶→5，000毫升搖瓶→100立升種子罐→1000立升種子罐→10，000立升發(fā)酵罐→離心分離菌絲→干燥菌絲→粉碎包裝。
1、一種冬蟲夏草菌絲的工業(yè)生產(chǎn)方法，由天然冬蟲夏草分離培養(yǎng)純化的菌種，進(jìn)行工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)，本發(fā)明的特征在于：
發(fā)酵罐培養(yǎng)基成份為
葡萄糖6～9%，蛋白脨1～2%，蠶蛹粉1～2%，磷酸二氫鉀0.15%，磷酸氫二鈉0.1%，滅菌前PH7.5，消泡油適量。
發(fā)酵罐培養(yǎng)條件為
接種量1/10～1/30，在24℃～29℃下培養(yǎng)，攪拌轉(zhuǎn)速200～250轉(zhuǎn)/分，風(fēng)量1～2∶1(V∶V)，罐壓0.5公斤/平方厘米，培養(yǎng)時(shí)間40～48小時(shí)。