本發(fā)明涉及用固體、液體培養(yǎng)基綜合培養(yǎng)食用菌類產(chǎn)品如菌種、菌飲料、菌絲體、蛋白糧等的方法。

改變?nèi)祟愂澄锝Y(jié)構(gòu)的主要途徑之一是全面拓展農(nóng)業(yè)食用菌類及同時拓展工業(yè)化食用菌類。營養(yǎng)學(xué)家近二十年來紛紛發(fā)現(xiàn)，各種菇體分別具有獨特的醫(yī)療價值及較完全的營養(yǎng)價值，而各類菌絲體效能比菇體高出十至三十倍，是食用菌一生中最精華生態(tài)，而新型五谷蛋白糧是人類今后理想的食品原料。

近年來發(fā)展的食用菌深層培養(yǎng)方法，即液體發(fā)酵法，正如美國專利申請?zhí)朥S4288555所公開的。如欲擴大菌種生產(chǎn)，至少要經(jīng)過3-4級逐級繁殖，如一個10噸發(fā)酵罐，所需菌種液要700-1000公斤，顯然單靠燒并搖床的一級種子是遠不能滿足要求，這樣必須經(jīng)多級繁殖，時間1～3日/級計，總計8-18天時間，而各級培養(yǎng)罐用不銹鋼制造，所需設(shè)備造價、材料能源耗費大，費時長。

目前還有一種固體培養(yǎng)基生產(chǎn)食用菌類產(chǎn)品的方法，它是以消過毒的五谷作為培養(yǎng)基，食用菌菌種接種在其上，雖然這樣提高五谷之營養(yǎng)成份，但費時長，并且菌種長大極為不均勻。

本發(fā)明的目的，簡化菌類產(chǎn)品生產(chǎn)方法，獲之一種消耗設(shè)備材料能源低的高效率生產(chǎn)方法并且在綜合培養(yǎng)法不同階段獲得不同種類食用菌產(chǎn)品。

為此目的，本發(fā)明解決方案是在液體培養(yǎng)法中使用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)出來菌種，而在固體培養(yǎng)法中使用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)出菌種，并且這兩個過程是同時進行。

在液體培養(yǎng)過程中，只須經(jīng)過篩洗固體菌種即可獲得大型液體深層發(fā)酵所需菌種量，并且在固體、液體綜合培養(yǎng)各階段獲之各種食用菌類產(chǎn)品。

本發(fā)明液體培養(yǎng)中用的菌種是由固體培養(yǎng)法獲之的菌種。培養(yǎng)液用熱交換器高溫滅菌，然后予冷藏，在一定溫度下加入配比一定的消毒過的固體菌種，并將之在培養(yǎng)液中打碎，經(jīng)過篩選。反復(fù)進行數(shù)次。這樣不僅獲之深層發(fā)酵中所用菌種而且還得到“干菌絲體”。

本發(fā)明液體深層發(fā)酵中輸入凈化氣體是使用沸石供氣法，這樣在培養(yǎng)液中連續(xù)不斷產(chǎn)生無數(shù)氣泡，成為繁殖初始點即在這些點上菌種開始進行發(fā)酵，生化，固氮等一系列生化作用形成懸浮的菌球，繼而獲之可食用菌類產(chǎn)品如菌膠或菌飲產(chǎn)品。

本發(fā)明固體培養(yǎng)食用菌采用一連續(xù)生產(chǎn)工藝過程經(jīng)吹、凈、浸、涼、灼過至少其中一種五谷培養(yǎng)基經(jīng)熱交換器螺旋管內(nèi)滅菌;又進入冷交換器螺旋管內(nèi)低溫冷卻至常溫按配比10-30%拌入菌膠，該菌膠即是由液體培養(yǎng)法冷藏槽中獲之。經(jīng)自動包裝;栽培，生產(chǎn)出新型食品原料五谷蛋白糧。

下面根據(jù)附圖詳細描述本發(fā)明。

圖1，傳統(tǒng)的液體深層發(fā)酵生產(chǎn)方法，

圖2、圖3，固體、液體綜合培養(yǎng)法生產(chǎn)流程圖。

圖1為一般傳統(tǒng)液體培養(yǎng)生產(chǎn)方法。用無菌操作挑取斜面菌種1-2塊，置入已滅菌盛有液體培養(yǎng)基的圓錐并中，培養(yǎng)液數(shù)量占瓶容積1/5或1/3接種后，種子瓶放在25℃下振蕩培養(yǎng)3-10天然后將已長濃的一級種子傾入盛有玻璃珠的無菌瓶中，瓶劇烈振蕩，打斷菌絲體，形成菌種懸浮液，然后以5-10%接種量置入二級培養(yǎng)罐中，三級接種量是10-15%，這樣10噸發(fā)酵罐以裝七噸計所需種子700-1050公斤，這樣，一級種子量遠遠不能滿足要求，必須成多級擴大，一般三、四級，必要時五級擴大，一般一級培養(yǎng)費時1-3天，所以獲得菌產(chǎn)品總需時6-18天。

根據(jù)圖2、圖3，固體、液體綜合培養(yǎng)法生產(chǎn)流程圖。液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)可同時進行，在一定范圍彼此利用其產(chǎn)物進行連續(xù)生產(chǎn)。例如可使用至少五谷之中一種為培養(yǎng)基，進行固體深層發(fā)酵。方法是將至少五谷之中任一種吹、凈、浸、涼、灼后經(jīng)熱交換器螺旋管高溫蒸汽攪拌滅菌10-14秒，并進入冷交換器超低溫冷卻螺旋管，第一根超低溫冷卻管溫度在-20℃左右，第二根螺旋管超低溫冷卻范圍大約在-30℃左右。螺旋管中固體粒流量大約1kg/秒。由超低溫冷卻螺旋管出來的固體培養(yǎng)基在常溫14℃-20℃流程中噴上菌膠。由配比10-30%左右液體深層發(fā)酵中獲得的菌膠，攪拌均勻。這樣，在每粒谷上配有幾個菌球，每毫升菌膠大約含3000-4600個菌球，每個菌球延生出菌管深進五谷中，將淀粉變成菌團，延生出菌絲體，包圍在五谷空隙中生長。由螺旋管攪拌均勻，裝入聚丙烯塑料袋五谷包;袋口保持微量通風(fēng)條件，經(jīng)栽培13-20天，生產(chǎn)出五谷菌絲體。該菌體可作為液態(tài)深層發(fā)酵中的菌種。若該五谷菌體經(jīng)篩洗、噴霧、干燥法，則可取得速溶菌絲體產(chǎn)品。而五谷（菌團）壓扁，干燥處理再加以香味可制成麥片，高梁片等即食天然食品，或稱五谷蛋白糧產(chǎn)品。

用液體培養(yǎng)基制備菌類產(chǎn)品方法：則是在煮水槽中由93℃熱水，并按一定碳氮比配制液體培養(yǎng)基，由高溫?zé)峤粨Q器通過培養(yǎng)液進行高溫滅菌，然后滅菌過的培養(yǎng)液通至冷藏槽（溫度的2-6℃）貯存?zhèn)溆?。篩洗固體菌種罐在使用前經(jīng)蒸汽吹洗滅菌15-20分鐘。同時進行五谷菌種包消毒處理。篩洗菌種罐一方面作為擴大菌種用，即培養(yǎng)出大型深層發(fā)酵所需菌種量，另一方面經(jīng)篩洗可獲之干菌絲體產(chǎn)品。將篩洗菌種罐中灌入1/4罐的培養(yǎng)液，放入一定配比量菌種包，根據(jù)培養(yǎng)目的，即如欲進行擴大菌種生產(chǎn)用則加入量為5-15%，最好為10%體積比菌種包;如欲獲之干菌絲體產(chǎn)品則可加入25-35%，最好為30%（按體積計）菌種包。開動打碎機，引入微量凈化過的空氣，而注意不使未凈化空氣進入罐內(nèi)。打碎機轉(zhuǎn)速200-300轉(zhuǎn)/分，打盤上下深入動作2-3次約20分鐘，至完全打碎包狀與塊狀菌體，篩洗出大約每公斤含1013-1016的菌管菌片最小單體繁殖點。再注入培養(yǎng)液至1/2罐中線處，開動打碎機機盤約5分鐘;再注入1/3罐培養(yǎng)液，打碎三分鐘，稀化之。原1∶10種子N（4）級擴大，在此一級完成。篩洗菌種罐一天能完成五-六次篩洗固體菌絲體。經(jīng)篩洗菌種，罐底部將經(jīng)篩洗過五谷（粒）導(dǎo)出，加工壓扁，烘干成麥片，高梁片等天然快速食品，剩余可烘干制成飼料。

在大型深層發(fā)酵罐中，采用了底部通入凈化空氣，為使供氣氣壓低，而供氣點多而采用沸石供氣法。這樣在培養(yǎng)液中連續(xù)不斷會產(chǎn)生無數(shù)氣泡，這些氣泡是菌種繁殖初始點，在浮升氣泡中，菌種繁殖點進行發(fā)酵、生化、固氮等一系列生化作用。由于空氣中含氮氣78%，促使培養(yǎng)液中菌管、菌片、懸浮菌球增多，培養(yǎng)液增濃，在32-48小時內(nèi)，培養(yǎng)液可增濃至3200-4700菌球數(shù)/毫升。在大型深層發(fā)酵罐中，為改進菌種繁殖條件，糖濃度由2%增至4-6%最好為5-6%，碳氮比范圍28∶1-20∶1，最好為25∶1相應(yīng)提高了培養(yǎng)液粘度。

由大型深層發(fā)酵罐培養(yǎng)出菌液或菌膠輸入微振冷藏槽中，其菌膠一方面可用于固體發(fā)酵中菌種，另一方面可送入菌飲加工廠制成菌飲料。本發(fā)明應(yīng)用固體、液體綜合培養(yǎng)法，由篩洗固體菌種罐，例如1000升培養(yǎng)罐直接跳級進入大型深層發(fā)酵罐，例如達250000升培養(yǎng)罐，一次完成菌種篩洗，而單純采用液體深層發(fā)酵法，為完成菌種擴大繁殖經(jīng)由若干級，逐級擴大培養(yǎng)繁殖，如圖1示，經(jīng)試管母種→燒瓶搖床→小型發(fā)酵罐→種子罐→繁殖罐→液體深層發(fā)酵罐→大型深層發(fā)酵罐。由于本發(fā)明工序大大簡化并且采用低壓汽吹洗;高溫快速滅菌程序，改革原有設(shè)備，管路系統(tǒng)，大大簡化設(shè)備，如由高壓式而變成低壓式;雙層式改變成單層式;節(jié)約材料，并且能源消耗降低;而生產(chǎn)周期得以縮短，并提高大型深層發(fā)酵罐使用效率。在應(yīng)用本發(fā)明進行固體、液體綜合培養(yǎng)過程中的不同階段可獲至各種食用菌類產(chǎn)品如菌種，菌絲體，菌飲料，蛋白糧等。

參見附表，由此對比可知應(yīng)用本發(fā)明所獲菌絲體PLⅡ，PLⅠ，L16各氨基酸量，及總量數(shù)據(jù)與用純液體深層發(fā)酵培養(yǎng)菌絲體氨基酸總量，如金頂蘑，平菇，香菇等均可高出四成。

附圖中符號的說明：

圖1中符號代表函意

151小型發(fā)酵瓶

501種子罐

5001繁殖罐

50001液體深層發(fā)酵罐

10T大型深層發(fā)酵罐

圖2中①煮水槽

②級配碳∶氮

③培養(yǎng)液超高溫滅菌

④培養(yǎng)液冷芷槽

⑤篩洗菌種罐

⑥大型深層發(fā)酵罐

⑦菌醪微振冷芷槽

（六）栽培五谷菌絲體

圖3中①煮水槽

②級配碳∶氮

③培養(yǎng)液超高溫滅菌

④培養(yǎng)液冷芷槽

⑤篩洗菌種罐

⑥大型深層發(fā)酵罐

⑦菌醪微振冷芷槽

（一）五谷（其一）凈、浸、涼、灼

（二）超高溫滅菌羅旋管

（三）超低溫冷卻羅旋管

（四）常溫拌菌醪

（五）自動包裝

（六）栽培五谷菌絲體

（a）菌絲體加工廠

（b）菌飲加工廠

（c）蛋白糧、菌種加工