本發(fā)明屬于微生物，具體涉及一種抗逆促生型微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、小麥（ triticum?aestivum?l.）是禾本科小麥屬一年生或越年生草本植物，小麥的穎果可以食用，是目前最重要的糧食作物之一。
2、土壤鹽堿化嚴(yán)重影響了植物的生長和作物產(chǎn)量，許多的農(nóng)業(yè)灌溉用地受到鹽脅迫的困擾，并且隨著人類對耕地不合理的利用和對環(huán)境的污染，土地鹽堿化問題日趨嚴(yán)重，鹽堿化土壤的理化性質(zhì)比較差，容易發(fā)生板結(jié)，土壤中不僅酶的活性受到抑制，其微生物的活性也受到影響。最終導(dǎo)致植物生長受到抑制，土壤的肥力下降。隨著全球氣候變化加劇，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)面臨干旱、鹽堿化等非生物脅迫日益嚴(yán)重。傳統(tǒng)化學(xué)肥料和植物生長調(diào)節(jié)劑在逆境條件下效果有限且可能造成環(huán)境污染。微生物菌劑作為一種環(huán)境友好型生物肥料，能夠通過多種機制促進植物生長并提高植物抗逆性。
3、但目前市場上的微生物菌劑普遍存在抗逆性不足、功能單一、田間效果不穩(wěn)定等問題，且沒有專門針對小麥抵抗鹽脅迫的微生物菌劑，因此，急需開發(fā)一種提高小麥抗逆促生的微生物菌劑。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，提供一種針對小麥在鹽堿地生長的抗逆促生型微生物菌劑，通過特定功能性菌種組合和其他增效成分的協(xié)同作用，顯著提高小麥在鹽堿地逆境條件下的生長表現(xiàn)。
2、為實現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
3、一種抗逆促生型微生物菌劑，所述微生物菌劑包括以下重量份的原料：
4、功能性微生物菌劑15-25份、海藻糖-脯氨酸復(fù)合納米顆粒3-5份、復(fù)合載體35-45份、含微量元素物質(zhì)2-3份。
5、進一步的，所述功能性微生物菌劑包括暹羅芽孢桿菌、雙向伯克霍爾德氏菌、云南鞘氨醇單胞菌；所述暹羅芽孢桿菌購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為cctcc?ab2022048，原始保藏日期為2022年1月7日；所述雙向伯克霍爾德氏菌購自中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為cgmcc?no.?1.10511，原始保藏日期為2010年3月29日；所述的云南鞘氨醇單胞菌購自中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為cgmcc?no.1.15275，原始保藏日期為2015年6月20日。
6、進一步的，所述功能性微生物菌劑的制備方法為：
7、（1）將暹羅芽孢桿菌和雙向伯克霍爾德氏菌解凍后在lb固體培養(yǎng)基中活化，分別挑取單菌落接種到lb液體培養(yǎng)基中，27℃、180r/min培養(yǎng)至od600=0.6得到種子液，種子液按照1%的量分別接種到250mllb液體培養(yǎng)基中27℃、180r/min培養(yǎng)，檢測菌液活菌數(shù)，達到1×108cfu/ml后結(jié)束培養(yǎng)，分別得到暹羅芽孢桿菌菌液和雙向伯克霍爾德氏菌菌液；
8、（2）將云南鞘氨醇單胞菌置于營養(yǎng)肉汁瓊脂培養(yǎng)基活化，挑取單菌落接種到營養(yǎng)肉汁液體培養(yǎng)基中，30℃、200r/min培養(yǎng)至od600=0.6得到種子液，種子液按照1%的量接種到250mllb液體培養(yǎng)基中30℃、200r/min培養(yǎng)，檢測活菌數(shù)，達到1×108cfu/ml后結(jié)束培養(yǎng)，得到云南鞘氨醇單胞菌菌液；
9、（3）將步驟（1）中暹羅芽孢桿菌菌液、雙向伯克霍爾德氏菌菌液和步驟（2）中云南鞘氨醇單胞菌菌液按照體積比1：1：1混合后，得到功能性微生物菌劑。
10、進一步的，所述海藻糖-脯氨酸復(fù)合納米顆粒的制備方法為：
11、將海藻糖和l-脯氨酸按質(zhì)量比2:1溶解于去離子水中，配制成10%溶液；再加入0.1%的殼聚糖作為穩(wěn)定劑；采用高壓均質(zhì)法在100mpa條件下處理5次，得到粒徑為50-100nm的復(fù)合納米顆粒；噴霧干燥得到粉末狀海藻糖-脯氨酸復(fù)合納米顆粒。
12、進一步的，所述復(fù)合載體包括腐殖酸、膨潤土、生物炭，三者的質(zhì)量比為3：2：1。
13、進一步的，所述含微量元素物質(zhì)包括螯合鋅、螯合鐵、螯合錳，三者的質(zhì)量比為4：3：2。
14、一種抗逆促生型微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟制備：
15、分別擴大培養(yǎng)三種菌株，得到三種菌株的菌液，等體積混合后得到功能性微生物菌劑，將功能微生物菌劑先與復(fù)合載體混合，然后加入海藻糖-脯氨酸復(fù)合納米顆粒和含微量元素物質(zhì)，充分混合均勻，調(diào)節(jié)水分含水量至25-30%，30℃下發(fā)酵48h，低溫干燥至水分含量小于10%，粉碎過80目，得到抗逆促生型微生物菌劑。
16、本發(fā)明還提供了所述的抗逆促生型微生物菌劑在促進小麥生長，并有效提高小麥耐鹽堿性的應(yīng)用。
17、本發(fā)明所用原料均市售可得。
18、有益效果
19、（1）本發(fā)明微生物菌劑通過暹羅芽孢桿菌、雙向伯克霍爾德氏菌、云南鞘氨醇單胞菌三種功能性菌株的等比例混合，協(xié)同配合，有效提高植株中抗氧化酶sod活性、增加滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)如脯氨酸和降低膜脂過氧化—mda含量降低，顯著促進鹽脅迫下小麥幼苗的生長，提高小麥產(chǎn)量。
20、（2）本發(fā)明首次將海藻糖與脯氨酸通過納米技術(shù)復(fù)合形成穩(wěn)定顆粒，作為微生物保護劑和植物抗逆誘導(dǎo)劑，在鹽堿條件下緩慢釋放，此外納米級顆粒更易被微生物和植物根系吸收利用。另外微量元素鐵、錳、鋅通過螯合形式添加到菌劑中，能有效被植物吸收利用，并通過與復(fù)合菌群的協(xié)同作用全面提升小麥植株的抗逆性與生長表現(xiàn)。
21、（3）本發(fā)明微生物菌劑，配合常規(guī)施肥施用，顯著促進鹽脅迫下小麥幼苗的生長和抗逆性，提高小麥產(chǎn)量。
1.一種抗逆促生型微生物菌劑，其特征在于，所述微生物菌劑包括以下重量份的原料：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗逆促生型微生物菌劑，其特征在于，所述功能性微生物菌劑包括暹羅芽孢桿菌、雙向伯克霍爾德氏菌、云南鞘氨醇單胞菌；所述暹羅芽孢桿菌的保藏編號為cctcc?ab?2022048；所述雙向伯克霍爾德氏菌的保藏編號為cgmcc?no.?1.10511；所述的云南鞘氨醇單胞菌的保藏編號為cgmcc?no.?1.15275。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗逆促生型微生物菌劑，其特征在于，所述功能性微生物菌劑的制備方法為：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗逆促生型微生物菌劑，其特征在于，所述海藻糖-脯氨酸復(fù)合納米顆粒的制備方法為：
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗逆促生型微生物菌劑，其特征在于，所述復(fù)合載體包括腐殖酸、膨潤土、生物炭，三者的質(zhì)量比為3：2：1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗逆促生型微生物菌劑，其特征在于，所述含微量元素物質(zhì)包括螯合鋅、螯合鐵、螯合錳，三者的質(zhì)量比為4：3：2。
7.一種權(quán)利要求1-6任意一項所述的抗逆促生型微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟制備：
8.一種權(quán)利要求1所述的抗逆促生型微生物菌劑的應(yīng)用，其特征在于，所述微生物菌劑用于促進小麥生長，并有效提高小麥在鹽堿地生長的抗逆性。