背景技術(shù)：

1、癌癥是世界范圍死亡的主要原因，2020年導(dǎo)致近1000萬人死亡(世界衛(wèi)生組織)。靶向療法和免疫療法通過大幅改善預(yù)后拓寬了實體瘤治療的視野。然而，腫瘤復(fù)發(fā)、耐藥性和藥物不耐受仍然是晚期癌癥管理的主要挑戰(zhàn)(wang等人,“drug?resistance?andcombating?drug?resistance?in?cancer,”cancer?drug?resistance,2019,2(2):141-160；chakraborty等人,“the?difficulties?in?cancer?treatment”ecancermedicalscience,2012,6:ed16)。癌細胞在其微環(huán)境中通常會經(jīng)歷各種應(yīng)激源，例如缺氧、低ph和營養(yǎng)素缺乏。為了在惡劣的腫瘤微環(huán)境中生存，癌細胞積極利用適應(yīng)性應(yīng)激途徑，例如整合應(yīng)激反應(yīng)(isr)(ye等人,“the?gcn2-atf4?pathway?is?critical?fortumor?cell?survival?and?proliferation?in?response?to?nutrient?deprivation,”embo?j.,2010,29(12):2082-2096；pakos-zebrucka等人,“the?integrated?stressresponse,”embo?rep.,2016,17(10):1374-1395)。isr由4種激酶組成：蛋白激酶核糖核酸[rna]樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶、雙鏈rna依賴性蛋白激酶、一般性調(diào)控阻遏蛋白激酶2(generalcontrol?nondepressible，gcn2)和血紅素調(diào)節(jié)抑制劑(donnelly等人,“the?eif2αkinases:their?structures?and?functions,”cell?mol?life?sci.,2013,70(19):3493-3511)。這四種激酶感知獨特的應(yīng)激源并磷酸化真核起始因子2的α亞基(eif2α)(albert等人,“adaptive?protein?translation?by?the?integrated?stress?response?maintainsthe?proliferative?and?migratory?capacity?of?lung?adenocarcinoma?cells,”molcancer?res.,2019,17(12):2343-2355)。作為isr的一部分，高分子量激酶gcn2感知氨基酸缺乏。在氨基酸缺乏下，不帶電的轉(zhuǎn)移rna會積累并激活gcn2(anda等人,“activation?ofgcn2?in?response?to?different?stresses,”plos?one,2017,12(8):e0182143)。isr激酶(例如gcn2)對eif2α的磷酸化會抑制細胞應(yīng)激期間的一般蛋白質(zhì)合成，但也會促進選定mrna的翻譯，該選定mrna包括激活轉(zhuǎn)錄因子4(atf4)，它是isr的關(guān)鍵效應(yīng)器(pakos-zebrucka等人)。翻譯后，atf4轉(zhuǎn)運到細胞核并驅(qū)動參與適應(yīng)應(yīng)激的基因的表達，例如自噬、抗氧化反應(yīng)、氨基酸生物合成和代謝(pakos-zebrucka等人；harding等人,“an?integratedstress?response?regulates?amino?acid?metabolism?and?resistance?to?oxidativestress,”mol?cell,2003,11(3):619-633)。激活gcn2的其他因素包括紫外光、病毒感染和氧化應(yīng)激(costa-mattioli等人,“the?integrated?stress?response:from?mechanism?todisease,”science,2020,368(6489):eaat5314)。atf4對腫瘤細胞維持氨基酸代謝穩(wěn)態(tài)很重要。isr途徑的激活促進腫瘤細胞在營養(yǎng)素缺乏下的存活(ye等人)。gcn2/atf4表達在原發(fā)性人肝臟、乳腺、肺和頭頸部腫瘤中升高，并且與正常組織相比，在結(jié)腸、乳腺和肺腫瘤樣本中觀察到gcn2激活。

2、isr激活在細胞命運決定中起著雙重作用。在急性應(yīng)激條件，isr可以促進適應(yīng)，而在慢性應(yīng)激條件，該途徑可以轉(zhuǎn)變?yōu)榧毎蛲觯瑥亩鴮?dǎo)致eif2α磷酸化在較長時間內(nèi)增加(wortel等人,“surviving?stress:modulation?of?atf4-mediated?stress?responses?innormal?and?malignant?cells,”trends?endocrinol?metabol.,2017,28(11):794-806)。通過減少蛋白質(zhì)合成或激活細胞凋亡途徑，isr的長期激活可能對細胞生長有害(wortel等人；harding等人,“ppplr14gene?knockout?reveals?an?essential?role?fortranslation?initiation?factor?2alpha(eif2alpha)dephosphorylation?in?mammaliandevelopment,”proc?natl?acad?sci?usa,2009,106(6)；1832-1837；münch,“thedifferent?axes?of?the?mammalian?mitochondrial?unfolded?protein?response,”bmcbiology,2018；16(1):81)。已證實由于eif2α磷酸酶突變而導(dǎo)致的持續(xù)isr激活已證實對胚胎發(fā)生具有有害作用(由于抑制蛋白質(zhì)合成)(harding等人,“ppplr14?gene?knockoutreveals?an?essential?role?for?translation?initiation?factor?2alpha(eif2alpha)dephosphorylation?in?mammalian?development,”proc?natl?acad?sci?usa,2009,106(6)；1832-1837)。gcn2激活還可以通過抑制一般蛋白質(zhì)合成和誘導(dǎo)細胞周期阻滯來產(chǎn)生抗增殖作用，從而阻止細胞在營養(yǎng)素缺乏時生長(lehman等人,“translation?upregulationof?an?individual?p21cip1?transcript?variant?by?gcn2?regulates?cellproliferation?and?survival?under?nutrient?stress,”plos?genetics,2015,11(6):e1005212)。因此，持續(xù)激活gcn2途徑可以抑制蛋白質(zhì)合成和細胞生長，從而抑制腫瘤增殖。

3、因此，仍然存在未滿足的需要來開發(fā)新的治療策略，該治療策略利用調(diào)節(jié)(激活或抑制)gcn2途徑來治療各種癌癥(例如晚期實體瘤和血癌)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、在一個方面，本文提供了在有需要的受試者中治療晚期實體瘤的方法，包括向受試者施用有效量的式(i)化合物

2、

3、或其藥學上可接受的鹽。

4、在某些實施方案中，晚期實體瘤選自頭頸部鱗狀細胞癌、結(jié)直腸癌、非小細胞肺癌、腎細胞癌和膀胱移行細胞癌。

5、在某些實施方案中，晚期實體瘤選自肉瘤、結(jié)直腸癌、頭頸癌和前列腺癌。

6、在另一個方面，本文提供了在有需要的受試者中治療血癌的方法，包括向受試者施用有效量的式(i)化合物

7、

8、或其藥學上可接受的鹽。

9、在某些實施方案中，血癌是白血病。在某些實施方案中，血癌是急性髓系白血病。

10、在一些實施方案中，血癌對b細胞淋巴瘤抑制劑具有抵抗性。在某些實施方案中，血癌對維奈托克具有抵抗性。

11、在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽激活了晚期實體瘤或血癌中的整合應(yīng)激反應(yīng)途徑(isr)。在一些實施方案中，isr激活是gcn2依賴的。

12、在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽誘導(dǎo)了晚期實體瘤或血癌中天冬酰胺合成酶(asns)、磷酸絲氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1(psat1)、磷酸甘油酸脫氫酶(phgdh)和/或bcl2結(jié)合成分3(puma)的表達。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽降低了晚期實體瘤或血癌中s100鈣結(jié)合蛋白a8/a9(s100a8/a9)、缺氧誘導(dǎo)因子(hif)1α/2α和/或葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1型(glut1)的蛋白質(zhì)水平。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽降低了晚期實體瘤或血癌中的線粒體呼吸和/或糖酵解。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽減少了受試者的髓系限制性前體和成熟髓系細胞。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽改變了晚期實體瘤或血癌中涉及氨基酸代謝、氧化應(yīng)激、尿素循環(huán)和/或嘧啶生物合成的代謝物。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽減少了晚期實體瘤或血癌中涉及氧化磷酸化的蛋白質(zhì)。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽減少了晚期實體瘤或血癌中hif和/或e2f轉(zhuǎn)錄因子1(e2f1)驅(qū)動的轉(zhuǎn)錄的活性。在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽增加了晚期實體瘤或血癌中的atf4和/或(jun原癌基因ap-1轉(zhuǎn)錄因子亞基)jun轉(zhuǎn)錄活性。

13、在某些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽包括向受試者施用約10mg至約150mg的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽(在游離酸當量重量基礎(chǔ)上)。在某些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽包括向受試者口服施用約10mg至約150mg的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽(在游離酸當量重量基礎(chǔ)上)。在某些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽包括每天向受試者口服施用約10mg至約150mg的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽(在游離酸當量重量基礎(chǔ)上)。在某些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽包括每天一次向受試者口服施用約10mg至約150mg的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽(在游離酸當量重量基礎(chǔ)上)。在某些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽包括連續(xù)21天每天一次向受試者口服施用約10mg至約150mg式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽(在游離酸當量重量基礎(chǔ)上)。

14、在某些實施方案中，受試者處于禁食狀態(tài)。在某些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽包括在餐前約1小時或餐后約2小時向受試者施用約10mg至約150mg的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽(在游離酸當量重量基礎(chǔ)上)。

15、在某些實施方案中，受試者先前已施用至少一種且不多于五種先前線的療法。

16、在某些實施方案中，藥學上可接受的鹽是鉀鹽。在某些實施方案中，鉀鹽是水合物。在某些實施方案中，所述鉀鹽是一水合物。

17、在某些實施方案中，該方法進一步包括向受試者施用有效量的第二治療劑。在某些實施方案中，第二治療劑選自免疫檢查點抑制劑、表皮生長因子受體(egfr)抑制劑、抗血管生成劑、維奈托克、氟尿嘧啶及其組合。

18、在一些實施方案中，第二治療劑選自抗血管內(nèi)皮生長因子受體(vegfr)抗體、氟尿嘧啶、磷酸肌醇3-激酶α(pi3kα)抑制劑、絲裂原激活蛋白激酶激酶1/2(mek1/2)抑制劑和缺氧誘導(dǎo)因子(hif)抑制劑。

19、在一些實施方案中，第二治療劑是維奈托克。

20、在一些實施方案中，施用有效量的式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽和維奈托克比單獨施用式(i)化合物或其藥學上可接受的鹽或維奈托克更大程度地激活晚期實體瘤或血癌中的整合應(yīng)激反應(yīng)途徑(isr)。

21、在一些實施方案中，第二治療劑是抗vegfr抗體。

22、在一些實施方案中，第二治療劑是hif抑制劑。在某些實施方案中，第二治療劑是貝組替凡(belzutifan)。

23、在一些實施方案中，第二治療劑是5-氟尿嘧啶。

24、在一些實施方案中，第二治療劑是pi3kα抑制劑。在一些實施方案中，第二治療劑是阿培利司。

25、在一些實施方案中，第二治療劑是mek1/2抑制劑。在一些實施方案中，第二治療劑是曲美替尼。

26、在一些實施方案中，第二治療劑是egfr抑制劑。在一些實施方案中，第二治療劑選自奧希替尼和達克替尼。

27、在某些實施方案中，受試者是人類。在某些實施方案中，受試者是成年人類。