本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及g9a抑制劑在用于制備治療干眼病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、干眼?。╠ry?eye?disease,?ded）是一種多因素的眼表疾病，其特征是淚膜失去穩(wěn)態(tài)，表現(xiàn)為淚液的質(zhì)、量及流體動(dòng)力學(xué)異常引起的淚膜不穩(wěn)定或眼表微環(huán)境失衡，可伴有淚液滲透壓升高以及眼表組織炎性反應(yīng)、損傷、神經(jīng)異常，臨床出現(xiàn)眼部干澀、燒灼感、畏光、異物感、疼痛及視覺功能障礙等多種癥狀。目前，全球ded的患病率范圍為5-50%并仍在逐漸增加，亞洲地區(qū)的患病率約為20.1%，我國流行病學(xué)研究顯示ded患病率約21.0%~52.4%，已成為最常見的一種眼科疾病。輕癥的干眼不影響或輕度影響視力，晚期的重癥干眼則可出現(xiàn)角膜緣上皮細(xì)胞功能障礙，角膜變薄、潰瘍甚至穿孔，也可形成角膜瘢痕嚴(yán)重影響視力。作為常見病、多發(fā)病，ded的病理環(huán)節(jié)十分復(fù)雜，核心病理改變是氧化應(yīng)激損傷導(dǎo)致的眼表炎癥激活與角結(jié)膜細(xì)胞凋亡等。同時(shí)，近期大量研究表明，自噬過程可作為ded發(fā)病機(jī)制的重點(diǎn)關(guān)注環(huán)節(jié)。在ded中，有限的自噬激活可能是保護(hù)性的，進(jìn)一步上調(diào)自噬水平往往可以阻止ded的病理進(jìn)展。
2、在容易引起ded的眾多高危因素中，后天環(huán)境因素至關(guān)重要，個(gè)體生活方式如睡眠障礙，長時(shí)間注視視頻終端、不良飲食習(xí)慣、吸煙等，外界環(huán)境狀態(tài)如高原缺氧、紫外線照射、低濕度地區(qū)、環(huán)境污染、空調(diào)暖氣等均可顯著增加ded發(fā)病。綜上，ded作為一種成因復(fù)雜、損傷形式多樣、對生活影響顯著、發(fā)病與外界環(huán)境影響密切相關(guān)的多發(fā)疾病，已成為患者的一大健康威脅。
3、機(jī)體在面對各種環(huán)境應(yīng)激時(shí)，會(huì)發(fā)生可逆的遺傳信息變化，在不改變dna序列的情況下影響到各種功能表型，即表觀遺傳，是目前疾病機(jī)制的研究熱點(diǎn)。組蛋白修飾作為表觀遺傳的一種主要表現(xiàn)形式，是一種以共價(jià)方式進(jìn)行的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，包括甲基化、磷酸化、乙?；?、乳酸化等，可影響基因的轉(zhuǎn)錄活性，在心血管疾病、自身免疫性疾病、纖維化疾病等疾病中發(fā)揮重要作用。其中，組蛋白h3上發(fā)生的修飾最多，發(fā)生在h3賴氨酸位點(diǎn)上的甲基化是基因表達(dá)調(diào)控中一種較為穩(wěn)定的標(biāo)記，代表性的有h3第9位賴氨酸上的二甲基化（h3k9me2），可能在基因啟動(dòng)子區(qū)通過限制轉(zhuǎn)錄因子和共激活因子的結(jié)合降低染色質(zhì)可及性，與下游基因的轉(zhuǎn)錄抑制相關(guān)。因此，由環(huán)境應(yīng)激引起的ded極有可能與基因啟動(dòng)子區(qū)表觀遺傳性的h3k9me2結(jié)合相關(guān)。
4、g9a，即常染色質(zhì)組蛋白n-甲基轉(zhuǎn)移酶2（euchromatic?histone?lysinemethyltransferase?2,?ehmt2），是催化形成h3k9me2的關(guān)鍵酶，被認(rèn)為是一種表觀遺傳阻遏物，可抑制下游基因的轉(zhuǎn)錄，且在上皮細(xì)胞系中表達(dá)相對豐富。g9a與炎癥的聯(lián)系已被大量研究證實(shí)。在脂肪細(xì)胞與乳腺腫瘤中，g9a的缺失可誘導(dǎo)炎癥因子的表達(dá)；在神經(jīng)炎癥模型中，較高的炎癥水平也可引起g9a轉(zhuǎn)錄活性增加。缺氧狀況會(huì)誘導(dǎo)g9a的表達(dá)，在氧化應(yīng)激條件下，g9a通過維持代謝穩(wěn)態(tài)和保障能量可用性來作為轉(zhuǎn)錄和代謝反應(yīng)之間的關(guān)鍵調(diào)節(jié)樞紐，增加機(jī)體對應(yīng)激的耐受性。此外，g9a也已被證明可影響細(xì)胞凋亡過程。在肝損傷模型及多種人類腫瘤中，抑制g9a可通過激活下游信號通路以上調(diào)凋亡水平。同時(shí)，g9a還與自噬之間存在緊密聯(lián)系。g9a可負(fù)性調(diào)節(jié)自噬的核心效應(yīng)因子及其上游調(diào)節(jié)因子，間接影響自噬水平，即抑制g9a可上調(diào)自噬基因表達(dá)并增強(qiáng)自噬通量。在胃癌、鼻咽癌、乳腺癌、骨髓瘤等多種癌癥疾病中，通過抑制劑或基因敲低方式調(diào)控g9a的表達(dá)來激活自噬已被證實(shí)是阻止疾病進(jìn)展的可行方式。
5、作為慢性疾病，對ded的治療往往需要長期堅(jiān)持，且見效緩慢，目前應(yīng)用于ded的藥物多為對癥治療，如人工淚液、局部類固醇、環(huán)孢素a等，但幾乎都有各自的局限性或缺點(diǎn)。因此，如何在機(jī)制層面尋找一個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)，為ded提供切實(shí)有效的治療方法，是目前仍待解決的重點(diǎn)問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，考慮到目前在干眼中尚未有與組蛋白甲基化修飾相關(guān)的研究報(bào)道，而g9a又可參與調(diào)控干眼中的核心病理環(huán)節(jié)，提供一種小分子抑制劑g9a抑制劑在用于治療干眼癥的新用途。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：
3、本發(fā)明提供了組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑在用于制備治療干眼病藥物中的新用途。
4、具體地，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑為unc0642，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
5、。
6、具體地，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑與高滲人角膜上皮細(xì)胞自噬環(huán)節(jié)之間的關(guān)聯(lián)，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠激活人角膜上皮細(xì)胞中的自噬。
7、本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑在體外干眼模型中表達(dá)下調(diào)，且與自噬活性標(biāo)志物lc3ii呈正相關(guān)，與p62呈負(fù)相關(guān)。組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑可促使保護(hù)性的自噬進(jìn)一步激活。
8、具體地，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑在緩解干眼病各病理環(huán)節(jié)中的應(yīng)用。
9、所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠降低炎癥因子tnf-α、il-1β、il-6的表達(dá)水平，減少了炎癥對角膜環(huán)境的損傷。
10、具體地，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠降低活性氧水平，減少干眼病程中的氧化應(yīng)激損傷。
11、具體地，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠降低干眼中晚期細(xì)胞凋亡比例，減少干眼病程中的細(xì)胞死亡。
12、具體地，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠恢復(fù)淚液分泌量與角膜損傷，改善干眼癥狀。
13、進(jìn)一步地，所述的藥物中組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑為唯一活性成分。
14、進(jìn)一步地，所述的藥物中包括組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑和其他用于治療或者緩解干眼病的活性成分。
15、進(jìn)一步地，所述的藥物中還包括藥學(xué)上可接受的輔料。
16、有益效果：
17、（1）本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑在干眼模型中的表達(dá)改變，并發(fā)現(xiàn)其與自噬有關(guān)，為干眼的治療提供了潛在分子靶點(diǎn)，具有良好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
18、（2）本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑unc0642的新用途：可以降低體外干眼模型中的炎癥因子、活性氧、晚期凋亡細(xì)胞率的水平，進(jìn)而挽救干眼的病理環(huán)節(jié)。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑在角膜中顯著改善了干眼癥狀，并具有抗炎功能。
1.組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑在用于制備治療干眼病藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑為unc0642，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠激活人角膜上皮細(xì)胞中的自噬。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠降低炎癥因子tnf-α、il-1β、il-6的表達(dá)水平。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠降低活性氧水平，減少干眼病程中的氧化應(yīng)激損傷。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠降低干眼中晚期細(xì)胞凋亡比例，減少干眼病程中的細(xì)胞死亡。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑能夠恢復(fù)淚液分泌量與角膜損傷，改善干眼癥狀。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物中組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑為唯一活性成分。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物中包括組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶g9a抑制劑和其他用于治療或者緩解干眼病的活性成分。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物中還包括藥學(xué)上可接受的輔料。