本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥和植物保護(hù)領(lǐng)域，涉及能夠引誘斜紋夜蛾成蟲(chóng)的關(guān)鍵植物源化合物的篩選及應(yīng)用，更具體為大豆中對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)。

背景技術(shù)：

1、斜紋夜蛾屬鱗翅目夜蛾科，是一類(lèi)重要的農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，其食性雜，具有暴食性和遷移能力強(qiáng)等特點(diǎn)。斜紋夜蛾寄主在自然界分布廣泛。目前主要以化學(xué)防治控制該蟲(chóng)危害，但這誘發(fā)了抗藥性、環(huán)境污染及農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留等問(wèn)題，亟待研發(fā)生態(tài)防控措施。專(zhuān)利cn110692641a公開(kāi)了一種防治斜紋夜蛾的新藥及其使用方法，所述新藥為環(huán)孢素a，所述斜紋夜蛾的2齡和3齡幼蟲(chóng)取食環(huán)孢素的致死濃度為100-150μm；環(huán)孢素a作用于斜紋夜蛾，可能抑制了去磷酸化酶的活性，進(jìn)而影響了昆蟲(chóng)體內(nèi)抗菌肽和解毒酶的表達(dá)和活性；但該方法在實(shí)際大面積應(yīng)用中存在一些藥物成本、施藥方式等限制。專(zhuān)利cn104621172a公開(kāi)了一種殺蟲(chóng)蛋白的用途，將斜紋夜蛾害蟲(chóng)至少與cry2ab蛋白接觸，通過(guò)植物體內(nèi)產(chǎn)生能夠殺死斜紋夜蛾的cry2ab蛋白來(lái)控制斜紋夜蛾害蟲(chóng)；對(duì)植物進(jìn)行全生育期、全植株的保護(hù)以防治斜紋夜蛾害蟲(chóng)的侵害；不過(guò)，這種借助植物自身產(chǎn)生殺蟲(chóng)蛋白的方式，可能面臨植物品種限制、蛋白表達(dá)穩(wěn)定性等挑戰(zhàn)。專(zhuān)利cn116606742a公開(kāi)了一種草酸青霉菌，對(duì)斜紋夜蛾和煙青蟲(chóng)均具有防效；但該微生物防治手段在田間復(fù)雜環(huán)境下，能否穩(wěn)定發(fā)揮作用，以及是否會(huì)對(duì)其他有益生物產(chǎn)生影響，還有待進(jìn)一步研究和驗(yàn)證。

2、利用植物揮發(fā)性物質(zhì)來(lái)引誘靶標(biāo)害蟲(chóng)，從而使害蟲(chóng)遠(yuǎn)離主栽作物，降低害蟲(chóng)的危害，是一種安全、有效的方法。通常，來(lái)源于植物的揮發(fā)性次生代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，易于合成，且具有與環(huán)境兼容性好、對(duì)非靶標(biāo)生物安全等優(yōu)點(diǎn)，是新型環(huán)保生物農(nóng)藥的研發(fā)方向之一。專(zhuān)利cn101940208a提供了一種引誘斜紋夜蛾的性信息素組合物及其誘芯，其組分包括：由順9反11-十四碳二烯乙酸酯和順9反12-十四碳二烯乙酸酯以3～13∶1的質(zhì)量比例混合組成的性信息素；另外增加有苯乙醛作為增效劑，其占總組分質(zhì)量的20～60％；該專(zhuān)利證明苯乙醛可提高斜紋夜蛾性信息素誘殺技術(shù)，解決了目前斜紋夜蛾因多次交配引起的防治效率不高問(wèn)題，對(duì)斜紋夜蛾性誘害蟲(chóng)防治和測(cè)報(bào)具有重要作用和意義。除了利用植物揮發(fā)性物質(zhì)增強(qiáng)性信息素的誘捕效果外，還可以研發(fā)直接針對(duì)雌成蟲(chóng)的引誘劑，這種防治方法相比傳統(tǒng)的性誘雄蛾技術(shù)更為精準(zhǔn)和高效，能夠顯著提升蟲(chóng)害防治效果和監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確性。

3、發(fā)明人前期文獻(xiàn)報(bào)道了大豆是引誘綠葉菜上斜紋夜蛾的誘集植物(萬(wàn)年峰,蔣杰賢,季香云.設(shè)施條件下青菜間作大豆或芋艿控制斜紋夜蛾效果及對(duì)捕食性天敵多樣性的影響[j].中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,20(2)：236-241)。在綠葉菜田周邊種植大豆引誘斜紋夜蛾，利用大豆間接調(diào)控綠葉菜上斜紋夜蛾。然而，這僅從生產(chǎn)應(yīng)用層面證明了大豆對(duì)斜紋夜蛾具有引誘效果，未能深究其引誘機(jī)理，更未能發(fā)現(xiàn)具有引誘作用的植物源揮發(fā)物種類(lèi)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、基于上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，本技術(shù)的目的是提供大豆中對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)。發(fā)明人通過(guò)氣相色譜-觸角電位聯(lián)用技術(shù)(gc-ead)、觸角電位技術(shù)(eag)、行為實(shí)驗(yàn)篩選對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有引誘的關(guān)鍵植物源化合物，為研發(fā)斜紋夜蛾成蟲(chóng)引誘劑、防治斜紋夜蛾提供理論基礎(chǔ)。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案之一，提供壬醛、葉醇和己醛在防治斜紋夜蛾成蟲(chóng)中的應(yīng)用。所述壬醛、葉醇和己醛對(duì)斜紋夜雌成蟲(chóng)均具有引誘作用；所述葉醇和己醛對(duì)斜紋夜雄成蟲(chóng)具有引誘作用。

3、本發(fā)明的技術(shù)方案之二，提供一種斜紋夜蛾雌成蟲(chóng)引誘劑，所述引誘劑的溶質(zhì)成分包括：壬醛、葉醇或己醛中的任一種或者任兩種；當(dāng)引誘劑中含有2種溶質(zhì)成分時(shí)，所述引誘劑中壬醛、葉醇和己醛幾種成分之間的比例為壬醛：葉醇＝1：1、壬醛：己醛＝1：1或葉醇：己醛＝1：1中的任一種；所述溶質(zhì)在引誘劑中的濃度為(1～100)μg/μl。

4、進(jìn)一步地，所述引誘劑的溶劑為二氯甲烷、石蠟油或正己烷中的至少任一種。

5、進(jìn)一步地，所述引誘劑通過(guò)人工配制的方法得到，或者通過(guò)從天然植物中收集提取得到。

6、本發(fā)明的技術(shù)方案之三，提供一種斜紋夜蛾雄成蟲(chóng)引誘劑，所述引誘劑的溶質(zhì)成分包括：葉醇、己醛中的至少任一種；當(dāng)引誘劑中含有2種溶質(zhì)成分時(shí)，所述葉醇、己醛的比例為2：1～1：2，優(yōu)選為1：1、2：1或1：2中的任一種，最優(yōu)選為1：1；所述溶質(zhì)在引誘劑中的濃度為(1～100)μg/μl。

7、進(jìn)一步地，所述引誘劑的溶劑為二氯甲烷、石蠟油或正己烷中的至少任一種；所述引誘劑通過(guò)人工配制的方法得到，或者通過(guò)從天然植物中收集提取得到。

8、本發(fā)明的技術(shù)方案之四，提供一種從大豆中提取對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)的方法。

9、進(jìn)一步地，該方法基于一種大豆揮發(fā)物的收集裝置，所述裝置的結(jié)構(gòu)包括：

10、大氣采樣儀(1)、活性炭過(guò)濾瓶(2)、加濕錐形瓶(3)、第一流量計(jì)(4)、玻璃罩(5)、吸附管(6)、第二流量計(jì)(7)；以上結(jié)構(gòu)通過(guò)管路按次序順次連接，且第二流量計(jì)(7)與大氣采樣儀(1)連接，整個(gè)裝置形成循環(huán)且密閉的通路。所述玻璃罩(5)用于放置植物；所述吸附管(6)中放置有porapak-q吸附劑，用于采集植物揮發(fā)物樣品。

11、進(jìn)一步地，所述方法基于上述收集裝置，步驟包括：

12、(1)測(cè)試前準(zhǔn)備：淋洗玻璃罩并烘干，將玻璃罩瓶口密封后，持續(xù)通入空氣；用錫箔紙包裹種植大豆的栽盆上口并露出大豆植株，以消除土壤與花盆揮發(fā)物的影響；

13、(2)揮發(fā)物收集：打開(kāi)大氣采樣儀，控制出氣口和進(jìn)氣口的空氣流速相同，此時(shí)吸附管中的porapak-q吸附劑持續(xù)吸附大豆植株的揮發(fā)物，持續(xù)抽氣一段時(shí)間后，使用溶劑將吸附有揮發(fā)物的porapak-q吸附劑洗脫，得到的洗脫液中含有對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有引誘活性的揮發(fā)性物質(zhì)，可以作為所述斜紋夜蛾雌成蟲(chóng)引誘劑和/或斜紋夜蛾雄成蟲(chóng)引誘劑。

14、步驟(1)中所述淋洗玻璃罩是指：先后用蒸餾水、無(wú)水酒精、丙酮淋洗玻璃罩；所述烘干是指：在180～220℃條件下烘烤1～3h，優(yōu)選為放入200℃烘箱烘烤2h；所述持續(xù)通入空氣的流速為150～400ml/min，優(yōu)選為200ml/min；

15、步驟(2)中所述出氣口和進(jìn)氣口的空氣流速均為480～520ml/min，優(yōu)選為500ml/min；所述持續(xù)抽氣的時(shí)間為10～15小時(shí)，優(yōu)選為12小時(shí)；所述洗脫采用的洗脫劑/溶劑為二氯甲烷、石蠟油或正己烷中的任一種，優(yōu)選為二氯甲烷；所述洗脫劑/溶劑的體積為1～5ml，優(yōu)選為1.5ml。

16、本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

17、(1)本發(fā)明首次在大豆的揮發(fā)成分中發(fā)現(xiàn)對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有行為響應(yīng)的6種揮發(fā)物(己醛、反式-2-己烯醛、葉醇、乙酸葉醇酯、壬醛和異佛爾酮)，斜紋夜蛾成蟲(chóng)對(duì)這6種化學(xué)物質(zhì)均有觸角電位反應(yīng)且具有強(qiáng)烈劑量依賴(lài)性，其中壬醛、葉醇、己醛對(duì)斜紋夜蛾雌成蟲(chóng)有引誘效果，葉醇、己醛對(duì)斜紋夜蛾雄蟲(chóng)有引誘效果。

18、(2)引誘劑中的壬醛和己醛體積比為1：1、壬醛和葉醇體積比為1：1時(shí)，對(duì)斜紋夜蛾雌蟲(chóng)有引誘效果；引誘劑中的葉醇和己醛體積比為1：1時(shí)，對(duì)斜紋夜蛾雄蟲(chóng)有顯著的引誘效果。

19、(3)本發(fā)明第一次發(fā)現(xiàn)大豆揮發(fā)物中壬醛、葉醇、己醛對(duì)斜紋夜蛾雌/雄蟲(chóng)有引誘作用，這為下一步研發(fā)植物源害蟲(chóng)引誘劑產(chǎn)品控制斜紋夜蛾雌成蟲(chóng)奠定了基礎(chǔ)。